操作步驟如下：
1.液體石蠟的準備
選用優良化學純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進行滅菌：
121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發水分，經無菌檢查后備用。
160℃干熱滅菌2個小時，冷卻后，經無菌檢查后備用。
2.斜面培養物的制備
參照定期移植法。
3.灌注石蠟
將無菌的液體石蠟在無菌條件下注入培養好的新鮮斜面培養物上，液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。
4.保藏
①注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時間2～10年。
②保藏期間應定期檢查，如培養基露出液面，應及時補充無菌的液體石蠟。
5.恢復培養
恢復培養時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上，生長繁殖后，再重新轉接一次。
