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技術知識

微生物檢驗方法-商業化快速微生物檢驗法

微生物檢驗方法-商業化快速微生物檢驗法
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產品介紹

微生物的檢測,其發展方向是快速,準確,簡便,自動化,當前很多生物制品公司利用傳統微生物檢測原理,結合不同的檢測方法,設計了形式各異的微生物檢測儀器設備,正逐步廣泛應用于醫學微生物檢測和科學研究領域。
 
 
在微生物檢驗操作過程中,要保證檢測環境(如超凈臺、檢測室)以及所用工器具的潔凈程度,同時保證人員各種操作的規范性,盡量保證其無菌性,防止因人為原因操作失誤而出現誤差結果,同時在適宜溫度進行培養,為合理決策和指導生產提供依據。
 
為保證檢測結果的準確性,我們應做好以下幾個方面。
 
培養基的滅菌及使用
 
1.每次配制時,要注意其生產日期是否在保質期內,查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質,并且未吸潮。
 
2.培養基配制時,稱量要準確,包括鹽水的分裝要準確。
 
3.要保證現配制現滅菌,未滅菌的配好培養基不能長時間放置,更不可隔夜。
 
4.滅菌時要保證恒溫、恒壓,同時要保證滅菌時間。
 
5.滅菌過的培養基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。
 
6.在使用時,要根據當班次的使用量,用水浴鍋先將培養基溶化為液態,然后及時調低水浴溫度(先化好的可從水浴取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬不可長時間使培養基處于高溫狀態。
 
7.做產品微生物檢測時,傾倒培養基溫度在 45℃左右,不可過燙,避免將菌燙死;也不可過涼,化好的培養基又結塊凝固,不便于觀察結果。
 
8.每瓶培養基均要做空白。
 
9.盡量集中做樣,避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞,增大培養基的污染幾率,出現誤差結果。
 
10.培養基剩余過少時,可先將其傾倒成空白用板。




 
檢測環境的維持
大環境(檢測室)
 
(1)檢測時,窗戶和空調要關閉,或用酒精對房間進行噴霧消毒,避免房間內空氣流通影響超凈臺內部環境(在有通排風系統的恒溫恒濕無菌間進行操作)。
 
(2)如果在原來的原料微生物檢測室進行檢測,要定期開啟紫外燈,對房間進行殺菌。
 
小環境(超凈工作臺)
 
1.定期清潔初效過濾器,要及時更換。 
 
2.檢測前,將超凈臺內部進行清潔,用 75%酒精進行擦拭消毒,并提前半小時將超凈臺紫外燈打開,對超凈臺內部環境進行殺菌。 
 
3.關紫外燈,開風機,調整合適進風量,風量不可過低。 
 
4.每次檢測后,要對超凈臺內部進行清理、清潔,并用 75%酒精進行擦拭消毒。 
 
5.紫外燈根據其使用壽命要及時更換。 
 
6.檢測同時,要做上相應菌落檢測的環境空白。 
 
7.檢測區域的選擇:
 
a、一般在距離超凈臺外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操作;
 
b、要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。




 
工器具的潔凈度
1.玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進行滅菌。 
 
2.檢測用剪刀、勺子等物品要做到檢測專用,不可與其它操作器具混用,使用時,先用75%酒精消毒,再采用灼燒方式進行滅菌。 
 
3.接種針(環)采用灼燒方式進行滅菌,但要注意檢測時要先將接種針(環)進行冷卻。




 
樣品的采集及檢測
1、保證采樣器具的無菌性
 
(1)玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進行滅菌,保證恒溫、時間足夠(但不可時間過長,容易導致玻璃器皿易裂紋而報廢)。 
 
(2)取樣筐:使用前要用75%酒精進行噴灑消毒。 
 
(3)取樣勺:要保證其清潔消毒,清潔后用75%酒精進行擦拭消毒。 
 
(4)取樣袋:可先用酒精進行擦拭消毒,再在超凈臺用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。 
 
(5)電子稱表面用 75%酒精消毒。
 
2、人員操作
 
(1)保證手部的清洗、消毒:取樣前及檢測前都要先洗手再消毒。
 
(2)取樣要具有代表性(隨機樣、目的樣、綜合樣)且要標示清楚。
 
(3)取樣完畢,不可在車間逗留,要及時將樣品放入超凈臺,對其外表面進行紫外燈照射消毒。
 
(4)在要求的檢測區域進行操作。
 
(5)檢測前,要用 75%酒精棉球對樣品袋口部進行擦拭消毒,再開口。
 
(6)往鹽水瓶加樣品時,要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
 
(7)樣品計量要準確,稀釋倍數也要準確(1mL 吸管不允許將管口敲掉),進行 100 倍稀釋時,1mL 吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品從管壁流下去,同時要避免將管底部捅破。
 
(8)鹽水溫度以 40℃左右為宜,不能過熱,會將部分微生物燙死;也不能溫度太低,不能將樣品溶解。
 
(9)進行稀釋時,要搖勻,保證溶液的均一性。
 
(10)傾倒平皿時,要注意培養基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養基要適量,不可以太少,在培養過程中易干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右為宜。
 
(11)做大腸菌群樣時,要提前將乳糖膽鹽培養基培養管按需要量備好,放入超凈臺對外表面進行紫外線滅菌。
 
(12)接二步時,要注意先將接種針(環)進行冷卻,避免出現接不上菌落的情況,導致無法判斷、確認。
 
(13)檢測完畢,及時放入相應培養箱進行培養,并清理清潔超凈臺。




 
微生物的培養
1.在培養過程中,要隨時監控培養箱溫度,保證其在適宜的溫度進行培養。
 
2.要按照《微生物檢驗規范》要求及時觀察結果,出現異常,要及時分析原因進行反饋。

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